凝血分析仪检测方法

　　凝血分析仪的前世今生

　　1910年，Kottman发明了世界上较早的血凝仪，通过测定血液凝固时粘度的变化来反映血浆凝固的时间。20世纪60年代，机械法血凝仪得到开发，出现了早期的平面磁珠法。70年代以后，由于机械、电子工业的发展，使各种类型的全自动血凝仪先后问世。80年代，由于发色底物的出现并应用于血液凝固的检测，使全自动血凝仪除了可以进行一般的筛选试验外，尚可以进行凝血、抗凝、纤维蛋白溶解系统单个因子的检测，使抗凝、纤溶的检测成为可能。90年代，全自动血凝仪免疫通道的开发将各种检测方法融为一体，检测的项目更加全面，为血栓与止血的检测提供了新的手段，进入了分子生物学时代。

　　凝血检测的项目及主要检测方法

　　凝血仪主要是用来对血液凝固检测的一种仪器，主要的检测项目为：凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-Dimer)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、抗凝血酶III(AT-III)

　　不同类型的凝血分析仪采用的原理不同，目前主要采用的检测办法有：凝固法、发色底物法、免疫学法等;开始的血凝仪的检测原理是基于凝固法的检测，因为该检测方法的电流法测量可靠性差，所以逐步被磁珠法和光学法所替代;而目前市面上主流的仪器一般是单独的光学法或者单独的磁珠法;这两种方法学又有何差异呢?

　　光学法(比浊法)

　　又分为散射法和透射法，光学法凝血仪是根据凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。根据待验样品在凝固过程中光的变化来确定检测终点的。当向样品中加入凝血激活剂后，随着样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的光强度逐步增加，仪器把这种光学变化描绘成凝固曲线，当样品完全凝固以后，光的强度不再变化。光学法凝血测试的优点在于灵敏度高、仪器结构简单、易于自动化;缺点是脂血、黄疸、溶血样本测不准，严重干扰测不出;从我们目前的认知来看，随着科学的进步，光学异常、加样气泡已经不会成为严重的干扰因素。

　　磁珠法

　　早期的磁珠法是在检测杯中放入一粒磁珠，与杯外一根铁磁金属杆紧贴呈直线状，标本凝固后，由于纤维蛋白的形成，使磁珠移位而偏离金属杆，仪器据此检测出凝固终点，这类仪器也可称为平面磁珠法。早期平面磁珠法能有效克服光学法中样品本底干扰问题，但存在灵敏度低等缺点。现代磁珠法出现在20世纪80年代末，90年代初进入商品化。现代磁珠法被称为双磁路磁珠法。测试原理如下：测试杯的两侧有一组驱动线圈，它们产生恒定的交变电磁场，使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动。凝血激活剂加入后，随着纤维蛋白的产生增多，血浆的粘稠度增加，小钢珠的运动振幅逐渐减弱，仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化，当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点。双磁路磁珠法的长处在于不受特异血浆的搅扰，在结构上，其检测原理完全不受溶血、黄疸及高血脂症的影响，甚至加样中产生气泡也不会影响测试结果的优点。缺陷是仪器、试剂成本偏高。